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蛋白LC-MS分析
蛋白LC-MS分析-详情"目前运用较广泛的识别和量化复杂蛋白质样品的技术通常是液相色谱（LC）和质谱（MS）技术，液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）结合了LC的物理分离能力和MS的质量分析能力，用于样品中蛋白定性定量分析。其中LC技术将多种组分分离，具有高分子特异性和检测灵敏度的MS技术则负责检测分析各组分的结构特征，两种技术联用得到了协同增强。与传统的蛋白鉴定技术相比，LC-MS分析技术具有高通量、快速、灵敏、准确，以及自动
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2023-09-18 |
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蛋白LC-MS/MS
蛋白LC-MS/MS-详情"液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）就是将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物进行更准确的定量和定性分析。通常情况下，同一细胞/组织的蛋白样品，在不同时间/不同环境条件下蛋白谱的表达也存在不同，可通过蛋白LC-MS/MS分析对其进行表征和详细分析。蛋白LC-MS/MS分析是将蛋白用蛋白酶酶切消化为肽段混合物，这些肽段经高效液相色谱分离，再由串联质谱进行分析鉴定。蛋白LC-MS/MS鉴定步骤：收
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2023-09-18 |
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N糖修饰发生修饰的位点
N糖修饰发生修饰的位点-详情"N-糖基化修饰发生在肽链的天冬酰胺（Asn）上，是zuì常见的糖基化修饰类型。N-糖结构是由14个单糖的前体链加到Asn残基上形成的，N糖修饰发生修饰的位点是肽链与糖链的结合位点。N-糖基化修饰具有位点特异性，其发生的位点一般在-Asn-X-Ser/Thr或-Asn-X-Cys（稀有）序列上，其中X为除脯氨酸以外的其他任何氨基酸，并且位于CH2结构域的五糖核心区域。相应的，N-糖基转移酶只能特异性识别特定氨基酸基序列
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2023-09-18 |
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蛋白质谱图鉴定
蛋白质谱图鉴定-详情"蛋白质质谱分析中，样本蛋白经过蛋白酶水解后成肽段，经过一维或者多维的色谱法分离，之后肽段被电离和被碎裂形成特征串联质谱谱图，利用自动数据比对程序，将质谱谱图转变成肽段序列。然后对肽段组装和拼接进行验证，将错误的肽段信息滤除，已经被鉴定的肽段序列用来推断样本中有哪些蛋白，当然一些肽段序列可能出现在不止一个蛋白中，这也会使推断过程更加复杂。在常规的蛋白质谱实验中，蛋白质谱图鉴定可通
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2023-09-18 |
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N-糖结构
N-糖结构-详情"糖蛋白是由14个单糖（Glc-3-Man-9-GlcNAc-2）的糖链末端N-乙酰基葡糖胺（GlcNAc）与蛋白质上天冬酰胺（Asn）的酰胺基团以N-糖苷键的形式共价连形成的。共价连接的序列位于CH2结构域的五糖核心区（Fc区）。N-糖的核心结构是五糖核心结构，五糖核心结构聚糖分子是由3个甘露糖（Man）和2个N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）所构成，其具有复杂的“双触角型”五糖分子结构。不同的聚糖分子可构成不同的糖型，且糖链长度、分叉方式
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2023-09-18 |
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蛋白质质谱鉴定的基本原理
蛋白质质谱鉴定的基本原理-详情"蛋白质是一条或者多条肽链以特殊方式组合而成的生物大分子，大多数蛋白质会自然折叠为一个特定的三维结构。蛋白质鉴定主要就是识别蛋白质的一级结构，即鉴定蛋白质肽链氨基酸的排列、分子量，以及二硫键数目和位置。蛋白质鉴定是蛋白质组学的基础，且对生物研究具有重大研究意义。传统的蛋白质鉴定方法包括蛋白质微量测序和氨基酸组成分析（比如Edman降解法），具有低通量、耗时费力、非自动化、灵
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2023-09-18 |
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糖蛋白结构分析
糖蛋白结构分析-详情"糖基化修饰是糖链在糖基转移酶的催化下，与蛋白质侧链氨基酸以糖苷键的形式共价连接，zuì终形成糖蛋白的过程。研究表明，超过50%的真核生物蛋白在经过糖基化修饰后，zuì终以糖蛋白的形式参与生命活动而发挥其作用。解析糖蛋白结构是理解其生理功能的一个重要前提。基于质谱的糖蛋白结构分析可使用液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）或亲水作用色谱串联质谱（HILIC-MS/MS）技术来开展。其基本流程为：shǒu先，使
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2023-09-18 |
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糖蛋白糖基化检测
糖蛋白糖基化检测-详情"糖基化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一，生物体中糖链共价结合蛋白质中特殊基团合成糖蛋白。经过糖基化修饰的糖蛋白在细胞识别、细胞间信号传递、细胞迁移中均具有重要作用，糖蛋白糖基化检测是研究生物体生命活动的一个重要方法。目前，糖蛋白糖基化检测通常使用糖蛋白亲和力检测方法、荧光探针方法以及质谱法，随着质谱分辨率的不断提高，基于质谱的糖基化检测技术已得到广泛的应用。在开始质谱检测之前
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2023-09-18 |
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